Забор осуществляется утром натощак, после 8 – 12 часового ночного периода голодания. Если у пациента нет возможности прийти в лабораторию утром, кровь следует сдавать после 6 часов голодания, исключив в утреннем приеме пищи жиры. Желательно за 1 – 2 дня до обследования исключить из рациона жирное, жареное и алкоголь. Допускается пить чистую негазированную воду. Помните! сок, чай, кофе, тем более с сахаром - тоже еда!!!

Исключить прием лекарств (за 48 часов до исследования по предварительному соглашению с врачом стероидных и тиреоидных гормонов).

Исключить физическую нагрузку и эмоциональное перенапряжение за 24 часа до забора.

Исключить употребление табака (за 1-3 часа).

При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендовано проводить повторные исследования в одинаковых условиях, в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и т.д. Время (период) забора определяет врач. Не соблюдение времени забора может повлиять на достоверность результатов.

НЕПОСРЕДСТВЕННО ПЕРЕД ЗАБОРОМ:

• Успокоиться
• Посидеть (не менее 5 минут)
• Проинформировать медицинскую сестру о наличии у пациента судорог, возбуждения, гемофилии (нарушения свертываемости, если известно)

ПОСЛЕ ЗАБОРА КРОВИ:

Держать руку в согнутом положении не менее 15 минут!

ПОМНИТЕ! Несоблюдение этих простых правил существенно повлияет на качество результата анализа и повлечет за собой нежелательные последствия, такие как синяки и гематомы в месте проведения манипуляций.

ВАЖНО! За соблюдение правил подготовки к процедуре забора крови ответственность возложена на пациента!

Показания к назначению анализа:

• дифференциальная диагностика между IgE-зависимым и не-IgE-зависимым механизмами аллергических реакций;
• больные, у которых невозможно выявить аллерген анамнестически, при помощи дневника и т.д.;
• больные с недостаточным эффектом специфической гипосенсибилизации, назначенной по результатам кожных проб;
• дермографизм и распространенный дерматит;
• больные детского и пожилого возраста с гипореактивностью кожи;
• гиперреактивность кожи;
• обследование в период обострения заболевания;
• больные, которым невозможно отменить симптоматическую терапию препаратами, влияющими на результаты кожных проб;
• отрицательное отношение больного к кожным пробам;
• в анамнезе системные аллергические реакции на кожные пробы;
• чрезмерно высокая чувствительность больного к аллергену;
• несоответствие результатов кожных проб данным анамнеза и клинической картине;
• IgE-зависимая пищевая аллергия;
• необходимость количественной оценки чувствительности и специфичности аллергена;
• общий IgE сыворотки крови более 100 кЕ/л.

Дифференциальная диагностика аллергической и псевдоаллергической природы заболевания.

“Золотым стандартом” в определении специфического IgE является применение RAST методики (радиоаллергосорбентный тест). Эта методика является дорогостоящей, да и не каждая клиника может и имеет право работать с радиоактивными изотопами. В лаборатории «Диасервис» для определения специфического IgE используется метод иммунохемилюминесции на автоматическом анализаторе IMMULITE 2000 фирмы Siemens (США), применение которого позволяет получить сопоставимые результаты с результатами, полученными RAST методом.

Преимущества аллергодиагностики in vitro на автоматическом анализаторе Immulite 2000 по сравнению с RAST методом:

• высокая специфичность и чувствительность метода сопоставимая с RAST методом;
• возможность составления произвольного набора аллергенов для пациента;
• быстрота выполнения;
• доступная стоимость исследования.

В настоящее время на Украине зарегистрированы и могут быть использованы для исследования, как отдельные аллергены, так и большое количество аллергопанелей, произведенные фирмой Siemens:

• около 280 индивидуальных аллергенов;
• панели пищевых аллергенов;
панели ингаляционных аллергенов;
• панели для определения аллергенов трав;
• панели для определения аллергенов клещей домашней пыли;
• панели для определения аллергенов животных;
• панели для определения аллергенов грибов.

Такая группировка панелей и отдельных аллергенов дает возможность быстро, без больших затрат ограничить круг значимых для пациента аллергенов и, при желании, предложить направление дальнейшего исследования. В in vitro диагностике аллергологических состояний в настоящее время можно выделить два взаимодополняющих подхода. Попробуем проиллюстрировать это на следующем примере.

Врач-терапевт может назначить больному, жалующемуся на длительную ринорею в весенний период, определение специфических IgE антител к пыльце деревьев (Tree panel: T2 – ольха, T4 – лещина обыкновенная, T12 – ива, T3 – береза, T7 – дуб), а при положительном результате - направить данного пациента на консультацию к аллергологу. Аллерголог, в свою очередь, заподозрив у больного поллиноз, назначает определение специфических IgE антител к пыльце конкретных деревьев. Такой подход позволяет врачу общей практики использовать скрининговые возможности in vitro аллергодиагностики, а врачу специалисту заняться точной верификацией диагноза.

Получение положительных результатов позволит врачу в какой-то мере прогнозировать клиническую картину в дальнейшем, назначить адекватную терапию и решить вопрос о возможности проведения специфической иммунной терапии.

Все методы in vitro аллергодиагностики определяют только специфические IgE антитела в сыворотке крови пациента, но не учитывают IgE антитела, фиксированные на поверхности иммунных клеток и тканевых клеток-мишеней. А в клеточном и тканевом «депо» может находиться значительное количество антител. Внутрисосудистый пул IgE имеет период полураспада 2,5 дня, представлен в виде мономера или в виде комплекса IgG-anti-IgE. Внесосудистый (тканевой) пул IgE представлен фиксированным IgE на высокоаффинных рецепторах тучных клеток и имеет ту же продолжительность жизни, что и тучные клетки – несколько месяцев.

Результаты тестов на индивидуальные аллергены:

Номер класса позволяет количественно (кЕ/л) оценить уровень IgЕ, специфичных к какому-либо аллергену.

Количественные значения и система интерпретации результата представлены в таблице ниже.

* Класс «0» - неопределяемые значения для тестов второго поколения

+ Неопределяемые значения для тестов третьего поколения

Результаты тестов для смешанных панелей аллергенов:

«Положительный» результат (Класс «I» или выше) для смешанной аллергологической панели показывает, что специфические IgE-антитела к одному или более из компонентов панели аллергенов находятся в повышенном количестве в сыворотке пациента. Чтобы определить, к какому из аллергенов панели присутствуют специфические IgE, надо протестировать пробу с использованием индивидуальных аллергенов, соответствующим аллергенам панели.

«Отрицательный» результат (Класс «0») показывает, что в пробе пациента отсутствуют IgE-антитела, специфичные для аллергенов данной аллергопанели.

Замечания:

Окончательный клинический диагноз должен быть поставлен врачом не только на основании результатов in vitro исследований, но после тщательного сбора анамнеза и с учетом всех клинических и лабораторных исследований.

При назначении иммунотерапии необходимо выполнить кожные тесты с предполагаемым разведением аллергенного экстракта для определения первоначальной дозы аллергена, к которой толерантен пациент. Выбор первоначальной дозы аллергена не может быть сделан на основании результатов определения аллерген-специфических IgE in vitrо.

При пищевой аллергии, специфические IgE-антитела могут не выявляться, если аллергическую реакцию вызывают вещества, образующиеся в процессе метаболизма и отсутствующие в исходном продукте.

Результаты, полученные при определении аллерген-специфических IgE in vitro, могут не соответствовать клиническим проявлениям, вследствие различной способности аллергенов связываться с IgE-антителами.

При интерпретации результатов необходимо учитывать возможность перекрестного реагирования специфических IgE-антител с аллергенами одного семейства.

Заниженные концентрации общего Ig E могут наблюдаться из-за конкурентного связывания аллергена со специфическим антителами других классов, особенно Ig G4.

Особенности интерпретации и диагностические ограничения специфического IgE:

1. Доступность определения специфического IgE не должна преувеличивать его диагностическую роль в обследовании больных с аллергией.
2. Обнаружение аллергенспецифического IgE (к какому-либо аллергену или антигену) не доказывает, что именно этот аллерген ответственен за клиническую симптоматику; окончательное заключение и интерпретация лабораторных данных должны быть сделаны только после сопоставления с клинической картиной и данными развернутого аллергологического анамнеза.
3. Отсутствие специфического IgE в сыворотке периферической крови не исключает возможности участия IgE-зависимого механизма, так как местный синтез IgE и сенсибилизация тучных клеток может происходить и в отсутствие специфического IgE в кровотоке (например, аллергический ринит).
4. Антитела других классов, специфичные для данного аллергена, особенно класса IgG (IgG4), могут быть причиной ложноотрицательных результатов.
5. Исключительно высокие концентрации общего IgE, например, у отдельных больных атопическим дерматитом, могут за счет неспецифического связывания с аллергеном давать ложноположительные результаты.
6. Идентичные результаты для разных аллергенов не означают их одинакового клинического значения, так как способность к связыванию с IgE у разных аллергенов может быть различной.